环肽药物作为医药领域的一颗冉冉升起的新星，其独特的结构和卓越的功能引起了全球科研人员的广泛关注。这些环状分子以其高稳定性和选择性，为治疗多种疾病提供了新的治疗策略。在环肽药物的研究中，基因编码展示技术和mRNA display技术发挥了重要作用。

mRNA display技术的应用范围广泛，不仅包括多肽和蛋白质适体的发现，还涵盖了蛋白质相互作用机制的深入阐明和分析，为环肽药物的研究提供了强有力的技术支持。

pg电子官网云讲堂邀请生物部高级研究员/项目经理刘超博士为您解答环肽药物研发中常见的问题，一起看看吧！

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1 筛选获得的大环肽有重复的序列吗？

刘超博士：确实存在这样的情况。在我们的测序分析中，我们发现了一些重复的序列。有时，这些重复可能意味着某个序列被多次筛选出来，导致拷贝数增加。可能有三个或四个序列指向同一个大环肽。对于这些具有相同序列的情况，我们将在后续的SPR验证或合成过程中给予重点关注。

2 如果可以提供靶点蛋白，我必须携带列出来的GST或者Fc标签吗？是否能换成其他的纯化标签吗？

刘超博士：可以通过下图看到文库的基本信息，环肽本身带有His标签的，标签是为了辅助环肽的提纯过程，除了His标签之外，其他各种标签也可用于靶点蛋白的纯化。这些靶点蛋白上的标签的关键作用是固定靶点蛋白，确保其在实验过程中的稳定地固定在beads上。

3 想问一下mRNA的环肽展示技术可以和生物合成相结合?利用植物中的环化酶去环化？

刘超博士：可以的，环化酶是通过两个环肽，类似直播中提到的半胱氨酸成环的。在我们实验室，环化是通过化学方法进行的，确保了环肽的完整性和功能性。环化完成后，我们会进行纯化步骤，以确保获得的环肽是完整且可以顺利结合的。这一纯化过程对于保证环肽的质量和活性至关重要，确保了我们能够提供高质量的环肽产品。

4 你们如何进行QC检测的？

刘超博士：我们采用的是高通量测序技术，目前还在开发LC-MS的方法。在实验的早期阶段，我们通过银染技术进行定性分析，以确保翻译过程中多肽的生成和翻译的顺利进行。在mRNA/cDNA与大环肽共轭物阶段，我们利用二代高通量测序技术，这有助于在筛选前确保文库的质量，并提供更准确可靠的数据。

5 请问通常mRNA筛选一轮需要多久？

刘超博士：从DNA文库到完成筛选和测序的整个流程，我们预计需要大约5至6周的时间。这个时间框架主要是由于文库测序阶段相对较长，大约需要两周左右。实际上，如果只考虑操作过程，完整的操作可以在两周内完成。

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